张钰;李福星;柳卓;刘雨;谭光波;

• 1:湖南中医药大学
• 2:湖南省中医研究院
• 3:湖南省中医药研究院附属医院

摘要(Abstract)：

目的 探讨金水六君煎对BEAS-2B细胞慢性阻塞性肺疾病（COPD）黏液高分泌的影响。方法 制备金水六君煎、生理盐水、阿奇霉素大鼠含药血清，采用10%CSE和20 ng/mL LPS构建COPD气道黏液高分泌的BEAS-2B细胞模型，分为正常组、模型组、金水六君煎组、阿奇霉素组，采用CCK8法检测细胞活性，Western blotting法检测网络药理学预测的MUC5AC、EFGR、VEGF蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组细胞活性降低（P <0.05），与模型组比较，金水六君煎含药血清组细胞活性升高（P <0.05），其中15%含药血清组升高较10%、20%含药血清组活性升高更明显（P <0.05）。与正常组比较，模型组细胞黏蛋白MUC5AC蛋白表达明显增多（P <0.05），提示COPD气道黏液高分泌造模成功。与模型组比较，金水六君煎组MUC5AC蛋白表达明显降低（P <0.05），与正常组比较，模型组EGFR、VEGF蛋白表达明显增多（P <0.05）。与模型组比较，金水六君煎组、阿奇霉素组EGFR、VEGF蛋白表达明显降低（P <0.05）。结论 香烟烟雾及脂多糖可诱导BEAS-2B细胞COPD黏液蛋白高表达，成功建立黏液高分泌模型。金水六君煎可明显抑制MUC5AC、EGFR、VEGF蛋白表达，且金水六君煎对MUC5AC蛋白的调控与EGFR、VEGF蛋白调控呈正相关。

关键词(KeyWords)： 慢性阻塞性肺疾病;黏液高分泌;金水六君煎;含药血清;香烟烟雾;BEAS-2B;大鼠

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目（82004306）;; 湖南省中医药“神农人才”工程

作者(Authors): 张钰;李福星;柳卓;刘雨;谭光波;

参考文献(References)：

• [1]张小娥，张彩莲.慢性阻塞性肺疾病流行病学及疾病经济负担研究进展[J].中国慢性病预防与控制，2017,25(6):472-476.
• [2]唐欣，万南生，杨夏，等.慢性气道黏液高分泌与慢性阻塞性肺疾病的研究进展[J].中华结核和呼吸杂志，2021,44(6):574-578.
• [3] Miravitlles M,Soler-Catalu?a JJ,Calle M,et al. A new approach to grading and treating COPD based on clinical phenotypes:summary of the Spanish COPD guidelines(GesEPOC)[J]. Prim Care Respir J,2013,22(1):117-121.
• [4]常琦.金水六君煎对稳定期慢性阻塞性肺疾病患者呼吸功能和免疫功能的影响[J].上海中医药杂志，2012,46(7):40-41.
• [5]王怡恬.基于MAPKs信号通路研究黄芩苷对脂多糖所致HBE16细胞粘液高分泌的干预机制[D].成都：成都中医药大学，2019.
• [6]柏正平，刘雨，谭小宁，等.金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠肺组织黏蛋白5AC及水通道蛋白5表达的影响[J].中国中医药信息杂志，2019,26(8):54-59.
• [7]柏正平，刘雨，谭小宁，等.金水六君煎拮抗地塞米松治疗慢性阻塞性肺病大鼠阴虚痰饮的实验研究[J].中药药理与临床，2019,35(3):19-24.
• [8]张玉新.基于EGFR/MAPK/MUC5AC通路探讨益肺健脾方对COPD模型大鼠气道黏液高分泌的影响[D].合肥：安徽中医药大学，2019.
• [9] Kim SH,Pei QM,Jiang P,et al. Upregulation of MUC5AC by VEGF in human primary bronchial epithelial cells:implications for asthma[J]. Respir Res,2019,20(1):282.
• [10] Li T,Zhou HP,Zhou ZJ,et al. Computed tomography-identified phenotypes of small airway obstructions in chronic obstructive pulmonary disease[J]. Chin Med J(Engl),2021,134(17):2025-2036.
• [11] Solomon GM,Fu L,Rowe SM,et al. The therapeutic potential of CFTR modulators for COPD and other airway diseases[J].Curr Opin Pharmacol,2017,34:132-139.
• [12]赵玉霞，梁济乐，楚中华.金水六君煎对哮喘缓解期患者免疫及肺功能的影响[J].浙江中医杂志，2001,46(9):30.
• [13]朱伟东，金普放，郦岳.金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病患者血清超氧化物歧化酶、丙二醛的影响[J].中国中医急症，2011,20(1):30,66.
• [14]孟辉，黎俏梅，沈英森，等.金水六君煎及其成分祛痰作用的药效学研究[J].中成药，2005,28(7):849-850.
• [15]周克琴，刘炜.中医药治疗慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌研究进展[J].亚太传统医药，2021,17(9):201-204.
• [16] Sinha J,Cao Z,Dai J,et al. A gastric glycoform of MUC5AC is a biomarker of mucinous cysts of the pancreas[J]. PLoS One,2016,11(12):e0167070.
• [17] Ma J,Rubin BK,Voynow JA. Mucins,mucus,and goblet cells[J]. Chest,2018,154(1):169-176.
• [18] Choi KE,Song JS,Kang B,et al. Immediate effect of 3%diquafosol ophthalmic solution on tear MUC5AC concentration and corneal wetting ability in normal and experimental keratoconjunctivitis sicca rat models[J]. Curr Eye Res,2017,42(5):666-671.
• [19] Currier MG,Lee S,Stobart CC,et al. EGFR interacts with the fusion protein of respiratory syncytial virus strain 2-20 and mediates infection and mucin expression[J]. PLoS Pathog,2016,12(5):e1005622.
• [20] Limvuttegrijerat T,Poachanukoon O,Koontongkaew S,et al.Crude ethanolic extracts of Zingiber cassumunar ROXB inhibit PMA-induced MUC2 and MUC5AC expression via ERK inhibition in human airway epithelial cells[J]. Asian Pac J Allergy Immunol,2014,32(4):328-336.
• [21]赵向.阿奇霉素通过PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α/VEGF途径对哮喘气道重塑的影响研究[D].郑州：郑州大学，2018.
• [22]朱长乐.清金化痰汤及黄芩苷通过TLR4/MyD88/NF-κB/NLRP3通路抑制LPS诱导的急性肺损伤的研究[D].北京：北京中医药大学，2020.
• [23]符秀曼，张美萃，范良，等.基于NF-κB通路和COX-2水平探讨小青龙汤加减方对LPS联合香烟烟雾诱导的COPD小鼠气道炎症和气道重塑的影响[J].中药材，2021,44(11):1-5.
• [24]林晓萍.乙酰半胱氨酸抑制脂多糖诱导的人肺NCI-H292细胞粘蛋白MUC5AC表达[J].北方药学，2016,13(11):122-124.
• [25] Deshmukh HS,Shaver C,Case LM,et al. Acrolein-activated matrix metalloproteinase 9 contributes to persistent mucin production[J]. Am J Respir Cell Mol Biol,2008,38(4):446-454.
• [26]吴燕萍. ATF3通过AP-1调控香烟烟雾诱导的气道粘液高分泌[D].杭州：浙江大学，2015.