单洁龄,李志强,吴书菊

• 1:上海市浦东新区浦南医院
• 2:上海中医药大学附属曙光医院

摘要(Abstract)：

目的观察清开灵注射液对脑缺血大鼠急性期病理形态学、炎症因子及凋亡基因Bcl-2和p53表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组以及实验组。除假手术组外均建立脑缺血大鼠模型。假手术组和模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃,阳性组给予尼莫地平灌胃,实验组注射清开灵注射液,7 d后评估各组大鼠的神经功能评分、神经行为学评分,比较脑梗死体积和神经细胞凋亡。Elisa法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)以及白介素-18(IL-18)等炎症因子水平,Western blotting法检测凋亡基因Bcl-2表达,免疫组织化学法检测凋亡基因p53的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠的脑组织神经元明显减少,结构模糊构型紊乱,不规则出现不同程度变性坏死及炎细胞浸润、核体固缩深染,脑梗死体积和神经细胞凋亡明显升高,BBB评分和神经功能评分明显降低(P <0.05);TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18等炎症因子水平明显升高(P <0.05);Bcl-2表达显著下调,p53表达显著上调(P <0.05)。给予药物干预后,阳性组和实验组的神经元均明显增多,有不同程度的缓解恢复,核固缩核体均有不规则程度的减轻,间质水肿减轻,细胞结构较完整,脑梗死体积和神经细胞凋亡水平明显降低,BBB评分和神经功能评分明显高于模型组(P <0.05),炎症因子明显降低,Bcl-2蛋白水平显著上调,p53表达显著下调(P <0.05)。结论清开灵注射液对脑缺血模型大鼠可有较地减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,调整凋亡相关因子表达,减少神经细胞的凋亡。

关键词(KeyWords)： 脑缺血;急性期;病理形态学;炎症因子;Bcl-2;p53;清开灵注射液;大鼠

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 上海市科学技术委员会科研计划项目(16402203728)

作者(Author): 单洁龄,李志强,吴书菊

参考文献(References)：

• [1]叶涛，朱路文，唐强，等.针预处理对脑缺血再灌注大鼠缺血半暗区细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响[J].中国康复理论与实践，2018,24(1):54-59.
• [2]马历历，李浩，孙立明，等.黄芪总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激、炎症、凋亡的影响[J].中成药，2019,41(8):1811-1185.
• [3]刘庆焕，王宏，张岩，等.复方红景天提取物对大、小鼠脑缺血模型的保护作用[J].中国现代应用药学，2018,35(4):524-528.
• [4]王丹，毛媛，刑晓娟.补中益气汤对急性脑缺血大鼠行为学及脑损伤的影响[J].中国中医基础医学杂志2019,25(6):739-742.
• [5]刘学，苏菊，杜鹏，等. UPLC-MS/MS分析注射用清开灵（冻干）中5种成分在正常大鼠和脑缺血大鼠体内的药代动力学行为[J].中国实验方剂学杂志，2019,25(22):86-91.
• [6] Ayelet Levy,Adi Bercovichkinori,Alexander G,et al. CD38facilitates recovery from traumatic brain injury[J]. Journal of Neurotrauma,2009,26(9):1521-1523.
• [7]李晓捷，郭岚敏.神经行为学检测和改良BBB运动功能评定在脑瘫大鼠运动功能评定中的应用[J].中国康复医学杂志，2008,23(12):1067-1070.
• [8]何玺君，彭余江，李慧勇.瑞舒伐他汀介入治疗对脑出血急性期大鼠血肿周围脑组织的影响[J].中国临床药理学杂志，2018,34(14):1622-1625.
• [9]周佳，刘恺，王涛.黄芪甲苷联合迷走神经电刺激对脑缺血再灌注模型大鼠血清氧化应激及炎症因子水平影响研究[J].中华中医药学刊，2019,37(7):1766-1769.
• [10] Jiao JT,Cheng C,Ma YJ,et al. Association between inflammatory cytokines and the risk of post-stroke depression,and the effect of depression on outcomes of patients with ischemic stroke in a 2-year prospective study[J]. Exp Ther Med,2016,12(3):1591-1598.
• [11]黄保胜，王星，李清泉，等.芒柄花黄素通过SphK1-SIP信号通路抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注后的炎症反应[J].南京医科大学学报：自然科学版，2017,37(10):1239-1256.
• [12] Verma R,Cronin CG,Hudobenko J,et al. Deletion of the P2X4 receptor is neuroprotective acutely,but induces a depressive phenotype during recovery from ischemic stroke[J].Brain Behav Immun,2017,S0889-1591(17):30384-30387.
• [13]李丹丹，肖学进，秦书俭，等.脑缺血再灌注损伤程度与自噬相关基因LC3、mTOR表达的相关性研究[J].中国临床解剖学杂志，2018,36(2):182-185.
• [14]何佳，鄢波，宋晓征，等.黄芪多糖缓解急性脑缺血再灌注损伤的氧化应激反应和免疫功能紊乱[J].中国免疫学杂志，2019,35(12):1443-1452.
• [15] Wang YZ,Wang SW,Zhang YC,et al. Protective effect of exogenous IGF-I on the intestinalmucosal barrier in rats with severe acute pancreatitis[J]. World J Emerg Med,2012,3(3):213-220.
• [16] Xu B,Chu F,Zhang Y,et al. A Series of new ligustrazine-triterpenes derivaives as anti-tumor agents:design,synthesis,and biological evaluation[J]. Int J Mol Sci,2015,16(9):21035-21055.
• [17]王齐，刘梅梅，雷娜，等.二苯乙烯苷对脑缺血再灌注沙鼠脑内p53、Bcl-2、Bax表达的影响[J].中国组织化学与细胞化学杂志，2018,27(1):18-22.
• [18]蔺梦娟.基于网络药理学和Meta分析的清开灵注射剂作用机制与临床应用研究[D].北京：北京中医药大学，2017.
• [19]王云，李东影，林凡凯，等.栀子治疗脑缺血的研究进展[J].中国实验方剂学杂志，2019,24(12):226-234.
• [20]李豪，何林，高原雪，等.微透析法测定脑缺血损伤后黄芩苷栀子苷及兴奋性氨基酸含量变化[J].中药药理与临床2019,35(1):107-112.