褚福永,刘巍,尚菊菊,刘红旭

• 1:首都医科大学附属北京中医医院

摘要(Abstract)：

目的研究益气逐瘀方(参元丹)对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响。方法分离并培养乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型,Lipofectamine2000转染miR-24 mimic/inhibitor至心肌细胞,实验分为正常组、缺氧组、参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组,治疗组予参元丹含药血清干预。比色法检测心肌细胞培养基上清液LDH、CPK活性,MTT法检测心肌细胞存活率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测心肌细胞miR-24、Bim mRNA表达。结果与低氧组相比,参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组均能显著降低细胞培养基上清液LDH、CPK活性(P <0.05),提高心肌细胞存活率(P <0.05),降低心肌细胞凋亡(P <0.05),升高心肌细胞miR-24 mRNA表达(P <0.05),降低Bim mRNA表达(P <0.05);治疗组之间比较,参元丹+miR-24 mimic组作用更显著(P <0.05)。结论益气逐瘀方参元丹能够减轻缺氧诱导乳鼠心肌细胞损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与其上调miR-24表达,同时抑制其靶基因Bim mRNA表达有关。

关键词(KeyWords)： 缺氧;心肌细胞;细胞凋亡;益气逐瘀方;参元丹;miR-24;乳鼠

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金青年基金项目（81603561）;; 教育部高等学校博士学科点专项基金项目（20131107120016）;; 首都医科大学附属北京中医医院杏林优才项目（201806）

作者(Author): 褚福永,刘巍,尚菊菊,刘红旭

参考文献(References)：

• [1] Krijnen PA,Nijmeijer R,Meijer CJ,et al. Apoptosis in myocardial ischemia and infarction[J]. Journal of Clinical Pathology,2002,55(11):801-811.
• [2] Qian L,Van Laake LW,Huang Y,et al. miR-24 inhibits apoptosis and represses Bim in mouse cardiomyocytes[J]. Journal of Experimental Medicine,2011,208(3):549-560.
• [3]褚福永，刘巍，刘红旭.益气逐瘀方对急性心肌梗死大鼠miR-24表达及心肌细胞凋亡的影响[J].世界中医药，2016,11(3):392-394.
• [4]褚福永，刘巍，尚菊菊，等.益气逐瘀方改善心肌梗死大鼠心肌损伤及对miR-24/Bim通路相关蛋白表达的影响[J].世界中医药，2018,13(8):1837-1840.
• [5] Hong-xu Liu,Ju-ju Shang,Fu-yong Chu,et al. Protective effects of Shen-Yuan-Dan,a traditional Chinese medicine,against myocardial ischemia/reperfusion injury in vivo and in vitro[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine,2013,956397.
• [6] Barile L,Lionetti V,Cervio E,et al. Extracellular vesicles from human cardiac progenitorcells inhibit cardiomyocyte apoptosis and improve cardiac function after myocardialinfarction[J]. Cardiovascular Research,2014,103(4):530-541.
• [7] Schirle NT,Sheu-Gruttadauria J,MacRae IJ. Gene regulation. Structural basis for microRNA targeting[J]. Science,2014,346(6209):608-613.
• [8] van Rooij E,Olson EN. MicroRNA therapeutics for cardiovascular disease:opportunities and obstacles[J]. Nature Reviews Drug Discovery,2012,11(11):860-872.
• [9]褚福永，刘红旭，程敏，等.急性冠状动脉综合征患者外周血miR-24表达与细胞凋亡及炎性因子的相关性研究[J].中华老年心脑血管病杂志，2016,18(8):808-812.
• [10]解欣然，李爱勇，林燕，等.参元益气活血汤后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[J].中国病理生理杂志，2010,26(10):1977.
• [11]尚菊菊，刘红旭，郭玉红，等.参元益气活血汤对垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血影响的血清学研究[J].世界急危重病医学杂志，2005,2(4):791-794.
• [12]尚菊菊，李爱勇，杨洪志，等.参元益气活血汤药理预适应对大鼠缺血再灌注心肌梗死面积、蛋白激酶C及热休克蛋白70的影响[J].中华中医药杂志，2011,26(8):1730-1733.
• [13] Hong-xu Liu,Ju-ju Shang,Fu-yong Chu,et al. Protective effects of Shen-Yuan-Dan,a traditional Chinese medicine,against myocardial ischemia/reperfusion injury in vivo and in vitro[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine,2013,Article ID 956397.
• [14]刘红旭，尚菊菊，赵子厚，等.参元丹胶囊对动脉内皮损伤大鼠血浆内皮素、血管紧张素Ⅱ、血清一氧化氮合酶影响的研究[J].中华中医药杂志，2006,21(12):743-746.
• [15]褚福永，刘巍，刘红旭.益气逐瘀方对心肌梗死大鼠心功能、细胞凋亡及miR-24相关基因表达的影响[J].北京中医药，2017,36(12):1059-1062,1161.