海螵蛸配伍鸡内金对小鼠骨折愈合影响的实验研究Study on Effects of Cuttlebone Combined with Chickens Gizzard-membrane Extract on Fracture Healing of Mice
俞立新,吴群峰,董卫芹,陈学强,郭松华,于健,冯炜,杨雷,傅一峰
摘要(Abstract):
目的通过X线、Micro-CT、ABH染色及血清学检测等方法观察海螵蛸配伍鸡内金提取液对小鼠胫骨骨折愈合过程的影响。方法 12周龄C57小鼠40只,在无菌条件下胫骨横形骨折造模并髓内钉固定,术后胫骨X线正侧位片剔除不合格小鼠,余下随机分为对照组、治疗组,并随机分为3个不同时间点。治疗组予海螵蛸鸡内金提取液灌胃,对照组予以七厘胶囊水溶液灌胃,于干预后第1周、2周、3周取样,X线观察骨折愈合大体情况,Micro-CT测量ROI骨痂总体积(BV)、总体积(TV)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁模式因子(Tb.Pf)、结构模型指数(SMI),并对样本进行组织形态学染色及血清学检测评估海螵蛸配伍鸡内金对小鼠骨折愈合的影响。结果 X线显示两组在骨折后1周两组骨折线清晰,在骨折后2周、3周治疗组骨折线较对照组模糊;MicroCT显示虽然两组间TV、Tb.Th在骨折后3个时间点均无显著差异,但治疗组BV、BV/TV、Tb.Pf、Tb.N和SMI在术后2周、3周均优于对照组(P <0.05);骨组织ABH染色发现,治疗组早期软骨骨痂明显多于对照组。治疗组小鼠血清在术后3个时间点VEGF、TGF-β1水平均高于对照组(P <0.05)。结论依据X线、Micro-CT、组织形态计量学及血清学检测,发现海螵蛸配伍鸡内金在骨折早期可促进血管新生,且在骨折中期有利于骨性骨痂生成,促进骨折的愈合。
关键词(KeyWords): 骨折;海螵蛸;鸡内金;Micro-CT;血管;小鼠
基金项目(Foundation): 浙江省医药卫生技术成果项目(2018PY087)
作者(Author): 俞立新,吴群峰,董卫芹,陈学强,郭松华,于健,冯炜,杨雷,傅一峰
参考文献(References):
- [1]董福慧,金宗濂,郑军,等.四种中药对骨愈合过程中相关基因表达的影响[J].中国骨伤,2006,19(10):595-597.
- [2]Mi M,Jin H,Wang B,et al.Chondrocyte BMP2 signaling plays an essential role in bone fracture healing[J].Gene,2013,512:211-218.
- [3]Lao Y,Xu T,Jin H,et al.Accumulated spinal axial biomechanical loading induces degeneration in intervertebral disc of mice lumbar spine[J].Orthopaedic Surgery,2018,10(1):56-63.
- [4]Wang P,Ying J,Luo C,et al.Osthole promotes bone fracture healing through activation of BMP signaling in chondrocytes[J].International Journal of Biological Sciences,2017,13(8):996-1007.
- [5]罗程,王萍儿,袁家俊,等.温阳补肾方对小鼠胫骨骨折愈合的影响[J].中华中医药杂志,2017,32(6):2665-2669.
- [6]Kevin R.O′Neill,Christopher M.Stutz,Nicholas A.Mignemi,et al.Micro-computed tomography assessment of the progression of fracture healing in mice[J].Bone,2012,50(6):1357-1367.
- [7]俞雷钧,刘宏,陆建伟,等.自拟活血补肾方对骨折延迟愈合的疗效及机制[J].中华全科医学,2015,13(3):469-471.
- [8]邢丹,马信龙,马剑雄,等.接骨灵丹胶囊对大鼠长骨干骨折愈合影响及基于Micro-CT技术对骨内微结构观察[J].中华中医药杂志,2015,30(2):552-556.
- [9]蔡晓华.海洋矿物药海螵蛸的研究进展与方向[J].中华中医药杂志,2018,33(9):4013-4015.
- [10]邱扬,邓高丕.海螵蛸伍鸡内金在妇人病血瘀证中的应用[J].中医杂志,2017,58(5):430-431.
- [11]范薏淇,赵嫣虹.海螵蛸的研究进展[J].中国民族民间医药,2016,25(4):47-48.
- [12]汪岩,王月珍,马千里,等.中药鸡内金研究进展[J].中国民族民间医药,2014,23(19):10-12.
- [13]Elise F Morgan,Zachary D Mason,Karen B Chien,et al.Micro-computed tomography assessment of fracture healing:Relationships among callus structure,composition,and mechanical function[J].Bone,2009,44(2):335-344.
- [14]高云,董福慧,郑军.海螵蛸对骨愈合相关基因表达的影响[J].中医正骨,2004,11(7):1-3.
- [15]Van Gastel N,Torrekens S,Roberts SJ,et al.Engineering Vascularized Bone:Osteogenic and Proangiogenic Potential of Murine Periosteal Cells[J].Stem Cells,2012,30(11):2460-2471.2019-05-19