张茜,张典,许悦,陈烯琳,秦露雪,郭长青

• 1:北京中医药大学

摘要(Abstract)：

目的 通过观察针刀干预对膝骨关节炎（KOA）兔软骨细胞氧化应激的影响，探讨其治疗KOA的作用机制。方法 将28只健康清洁级雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组，每组7只。除空白组外，余组以改良后Videman左后肢伸直位固定法造模并制动6周。治疗组干预4周后离体取材，用试剂盒分别测定各组膝软骨细胞一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px)活力，用免疫组化法测定各组膝软骨细胞内γ-H2AX表达。结果 模型组较空白组软骨细胞NOS及MDA活力升高（P <0.01）,SOD及GSH-Px活力下降（P <0.01）；针刀组NOS及MDA活力较模型组下降（P <0.05），针刀组及电针组SOD活力较模型组均升高（P <0.05）；模型组、电针组、针刀组之间GSH-Px活力无明显差异（P> 0.05）。模型组软骨细胞内γ-H2AX表达较空白组强（P <0.01），针刀组、电针组表达较模型组弱（P <0.05）。结论 针刀干预可通过降低软骨细胞NOS及MDA活力、升高SOD活力、减缓软骨细胞内DNA损伤而治疗异常生物力学诱发的KOA。

关键词(KeyWords)： 膝骨关节炎;针刀;软骨细胞氧化应激;兔

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金面上项目（82074523）;; 北京中医药大学2020年重点攻关项目（2020-ZXFZJJ-031）

作者(Author): 张茜,张典,许悦,陈烯琳,秦露雪,郭长青

参考文献(References)：

• [1] Mobasheri A,Batt M. An update on the pathophysiology of osteoarthritis[J]. Ann Phys Rehabil Med,2016,59(5-6):333-339.
• [2] Koike M,Nojiri H,Ozawa Y,et al. Mechanical overloading causes mitochondrial superoxide and SOD2 imbalance in chondrocytes resulting in cartilage degeneration[J]. Scientific reports,2015,5(1):1-16.
• [3] Gavriilidis C,Miwa S,Zglinicki TV,et al. Mitochondrial dysfunction in osteoarthritis is associated with down-regulation of superoxide dismutase 2[J]. Arthritis and rheumatism,2013,65(2):378-387.
• [4] Blanco FJ,Rego I,Ruiz-Romero C. The role of mitochondria in osteoarthritis[J]. Nature reviews. Rheumatology,2011,7(3):161-169.
• [5] Subrata K B. Does the Interdependence between Oxidative Stress and Inflammation Explain the Antioxidant Paradox[J].Oxidative Medicine and Cellular Longevity,2016,2016(12):1-9.
• [6] Yu S,Kim S. Withaferin A-caused production of intracellular reactive oxygen species modulates apoptosis via PI3K/Akt and JNKinase in rabbit articular chondrocytes[J]. Journal of Korean medical science,2014,29(8):1042-1053.
• [7]付达尔丽.针刀与毫针干预对膝骨关节炎兔内、外侧副韧带力学影响的对比研究[D].北京：北京中医药大学，2014.
• [8]杨雪，王彤，王春久，等.针刀松解腘绳肌对膝骨性关节炎兔膝周肌群表面张力的影响[J].世界中医药，2020,15(12):1705-1079.
• [9]付昕怡，马诗凝，张伟，等.针刀干预对膝骨性关节炎模型兔股直肌Akt/mTOR通路的调控作用[J].针灸临床杂志，2019,35(9):67-71.
• [10]郭义，方剑桥.实验针灸学[M].北京：中国中医药出版社，2012.
• [11]王冰.黄帝内经素问[M].北京：人民卫生出版社，1956.
• [12]张义，权伍成，尹萍，等.针刀疗法的适应证和优势病种分析[J].中国针灸，2010,30(6):525-528.
• [13]杨峥，何乐人.软骨细胞周基质及其参与力学信号转导的研究进展[J].医学综述，2021,27(6):1090-1095.
• [14] Wolff KJ,Ramakrishnan PS,Brouillette MJ,et al. Mechanical stress and ATP synthesis are coupled by mitochondrial oxidants in articular cartilage[J]. J Orthop Res,2013,31(2):191-196.
• [15] Henrotin Y,Kurz B,Aigner T. Oxygen and reactive oxygen species in cartilage degradation:friends or foes[J]. Osteoarthritis Cartilage,2005,13(8):643-654.
• [16] Del RD,Stewart AJ,Pellegrini N. A review of recent studies on malondialdehyde as toxic molecule and biological marker of oxidative stress[J]. Nutr Metab Cardiovasc Dis,2005,15(4):316-328.
• [17] Minguzzi M,Cetrullo S,D′Adamo S,et al. Emerging players at the intersection of chondrocyte loss of maturational arrest,oxidative stress,senescence and low-grade inflammation in osteoarthritis[J]. Oxid Med Cell Longev,2018,2018(2):1-17.
• [18]崔杰，谈力欣，牛素贞，等.独活寄生汤口服或熏蒸对气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者MDA和GSH-Px水平的影响[J].江苏中医药，2018,50(12):27-30.
• [19]李祥.膝骨关节炎患者关节液自由基含量特点及其与证候的相关性研究[D].北京：北京中医药大学，2020.
• [20]周巧，刘健，宋倩，等.膝骨关节炎患者外周血单个核细胞CD36表达与氧化应激的相关性研究[J].风湿病与关节炎，2021,10(3):6-10,27.
• [21] Bresciani G,Da CI,Gonzalez-Gallego J. Manganese superoxide dismutase and oxidative stress modulation[J]. Adv Clin Chem,2015(68):87-130.
• [22]周巧.健脾化湿清热通络法改善湿热型膝骨关节炎超氧化物歧化酶的数据挖掘及机制研究[D].合肥：安徽中医药大学，2018.
• [23]谈倩，李佳，李柏村，等.温针灸减轻膝骨性关节炎大鼠软骨组织的氧化损伤和炎性反应[J].针刺研究，2022,47(4):321-328.
• [24]陈瑜，王锐卿，刘敬萱，等.艾灸对膝骨关节炎患者炎性因子及氧化应激因子的影响：随机对照研究[J].中国针灸，2020,40(9):913-917.
• [25]柯湘宇.氧化应激中热休克蛋白90对MRN复合物相关的DNA双链断裂损伤修复通路的调控机制研究[D].广州：南方医科大学，2017.
• [26]瞿敏敏，陈佳，郭磊，等. DNA损伤标志物γ-H2AX及其在毒性测试应用中的研究进展[J].中国药理学与毒理学杂志，2021,35(6):401-411.
• [27]华植.经筋松解调控MAPK信号通路治疗兔膝骨关节炎的机制研究[D].广州：广州中医药大学，2018.
• [28]薛艳芝.不同浓度右美托咪定对软骨细胞诱导型一氧化氮合酶的作用研究[D].衡阳：南华大学，2020.
• [29]黄怡然，金英利，李娜，等.针刀、电针和圆利针对兔膝骨关节炎软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13和TIMP-1表达的影响[J].中华中医药杂志，2014,29(8):2600-2604.