苏木乙酸乙酯提取液靶向调控miRNA-99a抑制动脉粥样硬化的作用机制研究Mechanism of Sppan Acetic Ether Extract Targeting Regulation of miRNA-99a on Atherosclerosis
于玲,曹丽娟,孙静,周亚滨
摘要(Abstract)：
目的研究苏木乙酸乙酯提取液(SAEE)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、凋亡的机制及miRNA-99a在其中的可能作用。方法 ox-LDL诱导VSMC模型,分别将SAEE(200μg/mL)、miRNA-99a模拟剂、miRNA-99a抑制剂作用于细胞。采用MTT法检测各组VSMC的增殖,流式细胞学检测其凋亡水平,Western blotting法检测细胞中Ki-67、PCNA、Bax、Bcl-2、MMP-1、TIMP-1蛋白的表达,RT-PCR检测细胞中miRNA-99a的表达。结果与空白组相比,ox-LDL能显著增加VSMC细胞增殖、晚期凋亡和总凋亡率,上调细胞中Ki-67、PCNA、Bax、MMP-1蛋白的表达及Bax/Bcl-2、MMP-1/TIMP-1的比值,下调Bcl-2、TIMP-1蛋白和miRNA-99a的表达,差异均具有显著统计学意义(P <0.01);SAEE能够抑制VSMC细胞增殖、晚期凋亡和总凋亡率,上调Bcl-2、TIMP-1蛋白和mi R-99a的表达,下调细胞中Ki-67、PCNA、Bax、MMP-1蛋白的表达及Bax/Bcl-2、MMP-1/TIMP-1的比值,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P <0.01)。结论 SAEE能够通过上调细胞中miRNA-99a的表达,抑制VSMC细胞增殖、凋亡和细胞外基质的降解,促进斑块的稳定和防止纤维帽的破裂,发挥抗动脉粥样硬化的作用。
关键词(KeyWords)： 动脉粥样硬化;苏木乙酸乙酯提取液;血管平滑肌细胞;增殖;凋亡;miRNA-99a;大鼠
基金项目(Foundation): 国家科技重大专项课题(2009ZX09103-425);; 黑龙江省科技攻关计划项目(GC06C32804);; 黑龙江省教育厅面上项目(11511375);; 黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划(1253G055)
作者(Author): 于玲,曹丽娟,孙静,周亚滨
参考文献(References)：
- [1]倪雪峰,焦力,陆涛,等.高龄人群的全因死亡分析[J].中华保健医学杂志,2017,19(1):55-57.
- [2]孙宜,张瑞岩.防治冠状动脉病变进展的药物[J].国际心血管病杂志,2018,45(5):270-272,280.
- [3]袁帅,廖思聪,王大新.血管平滑肌细胞与动脉粥样硬化关系的研究进展[J].实用心脑肺血管病杂志,2018,26(2):6-8,12.
- [4]杨建飞,魏来,张婧懿.苏木乙酸乙酯提取物对动脉粥样硬化模型大鼠血脂及MMP-9的影响[J].中医药信息,2017,34(3):14-16.
- [5]李海禹,孟哲,王琛,等.槲皮素对氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞炎症反应的影响[J].中国合理用药探索,2018,15(3):29-33.
- [6]胡俊青,张征宇.芦丁抑制氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖[J].国际心血管病杂志,2017,44(5):299-301.
- [7]宋飞,王新美,赵文娟.高尿酸血症对大鼠主动脉平滑肌细胞Ki-67及尿酸盐阴离子交换器表达的影响[J].中国组织工程研究,2012,16(28):5222-5226.
- [8]金红芳,田悦,闫辉,等.硫化氢对正常及自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞PCNA和p-ERK蛋白表达的影响[J].中国药理学通报,2008,24(2):160-165.
- [9]吴建文,顾耘.血管平滑肌凋亡与斑块稳定性及其中医药防治[J].中华中医药学刊,2015,33(2):375-377.
- [10]王晓敏,席晓甜,刘海云,等.菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响[J].中国老年学杂志,2015,35(20):5742-5744.
- [11]荣晓凤,李荣亨,王维.气虚血瘀证大鼠血管平滑肌细胞Bcl-2及Bax相关凋亡因子的表达[J].中国老年学杂志,2010,30(5):648-650.
- [12]景丽,张建中,秦璟,等.凋亡相关基因Bcl-6和Bax在高血压大鼠血管平滑肌细胞中的表达[J].宁夏医学院学报,2004,26(2):79-81,91-157.
- [13]杨瑞芳,阴彦龙,杨敏清,等.基质金属蛋白酶与动脉粥样硬化及斑块破裂的关系[J].分子影像学杂志,2017,40(4):482-485.
- [14]余丹青,陈纪言,李光,等.基质金属蛋白酶与冠状动脉斑块稳定性相关研究[J].中国循环杂志,2003,18(2):105-107
- [15]王乐,王卫杰,李惠,等.动脉粥样硬化相关miRNA研究进展[J].临床医药实践,2017,26(1):54-56,65.
- [16]张紫微,杨丽霞,郭瑞威,等. miR-99a对高胰岛素诱导小鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究[J].解放军医学院学报,2016,37(11):1164-1168.